固相萃取(qǔ)儀在(zài)檢測食品中(zhōng)三(sān)聚氰胺檢測中(zhōng)的(de)應(yìng)用(yòng)

三(sān)聚氰胺是(shì)一(yī)種(zhǒng)重(zhòng)要(yào)的(de)氮雜环(huán)有(yǒu)機(jī)化(huà)工原料，水(shuǐ)溶液显弱(ruò)碱性(xìng)，能(néng)溶于(yú)甲醇、乙酸(suān)等，微溶于(yú)水(shuǐ)和(hé)乙醇，不(bù)溶于(yú)乙醚、苯等，而(ér)且在(zài)傳統C-18柱(zhù)上(shàng)保留很 差。利用(yòng)此(cǐ)特(tè)性(xìng)，人(rén)们(men)普遍(biàn)采用(yòng)離子对(duì)试劑液相色(sè)譜法(fǎ)和(hé)液质聯用(yòng)方(fāng)法(fǎ)進(jìn)行檢測。但由(yóu)于(yú)食品基质複雜，使得樣(yàng)品的(de)處(chù)理(lǐ)甚關(guān)键。我们(men)采用(yòng)三(sān)酸(suān)提(tí)取(qǔ)，固相萃取(qǔ)小柱(zhù)淨化(huà)，輔以(yǐ)固相萃取(qǔ)儀操作(zuò)，建立一(yī)套(tào)快(kuài)速、準确、重(zhòng)現(xiàn)性(xìng)良好(hǎo)的(de)樣(yàng)品外(wài)理(lǐ)方(fāng)法(fǎ)。

主(zhǔ)要(yào)儀器與(yǔ)试劑

高(gāo)效液相色(sè)譜儀、配四(sì)元(yuán)梯(tī)度(dù)泵、在(zài)線(xiàn)真(zhēn)空(kōng)脫气(qì)機(jī)、自(zì)動(dòng)進(jìn)樣(yàng)器、柱(zhù)温(wēn)箱(xiāng)、二(èr)极(jí)管(guǎn)阵(zhèn)列檢測器、固相萃取(qǔ)儀、超聲波(bō)清(qīng)洗器、離心(xīn)機(jī)、固相萃取(qǔ)小柱(zhù)：OASIS MCX，6mL，500mg。三(sān)聚氰胺标(biāo)準品，純度(dù)99%。

樣(yàng)品處(chù)理(lǐ)

提(tí)取(qǔ)：準确稱取(qǔ)經(jīng)粉碎混勻後(hòu)樣(yàng)品5.0g，加入(rù)50mL 1%三(sān)氯乙酸(suān)溶液及(jí)2 mL 2%乙酸(suān)铅(qiān)溶液，混勻後(hòu)超聲提(tí)取(qǔ)30min，高(gāo)速離心(xīn)後(hòu)取(qǔ)上(shàng)清(qīng)液待淨化(huà)。

淨化(huà)：将固相萃取(qǔ)小柱(zhù)(6mL，500mg)置于(yú)固相萃取(qǔ)儀樣(yàng)品架上(shàng)，分(fēn)别加入(rù)5mL甲醇、5mL水(shuǐ)活化(huà)，再準确移取(qǔ)5.0mL離心(xīn)液上(shàng)柱(zhù)。活化(huà)及(jí)上(shàng) 樣(yàng)时(shí)，将樣(yàng)品架升(shēng)至(zhì)頂部(bù)通(tòng)过(guò)調节(jié)面(miàn)闆旋鈕来(lái)調节(jié)N2气(qì)流小，控制流速不(bù)超过(guò)1mL/min。然後(hòu)再用(yòng)5mL水(shuǐ)、5mL甲醇洗滌SPE   柱(zhù)，棄去(qù)洗脫液，将小柱(zhù)升(shēng)至(zhì)頂部(bù)調节(jié)气(qì)閥旋鈕自(zì)動(dòng)加压吹干(gàn)小柱(zhù)，用(yòng)5%氨水(shuǐ)甲醇溶液5mL洗脫，收(shōu)集洗脫液用(yòng)氮吹儀吹干(gàn)，用(yòng)甲醇-水(shuǐ)(2:8,V/V)定 容至(zhì)1.0mL,过(guò)0.45μm濾膜,上(shàng)機(jī)測定。

樣(yàng)品提(tí)取(qǔ)與(yǔ)淨化(huà)

三(sān)氯乙酸(suān)具有(yǒu)沉澱乳及(jí)其(qí)制品中(zhōng)蛋白(bái)质的(de)作(zuò)用(yòng),而(ér)且有(yǒu)助于(yú)三(sān)聚氰胺的(de)溶解(jiě).由(yóu)于(yú)三(sān)聚氰胺呈弱(ruò)碱性(xìng)。(弱(ruò)陽離子化(huà)合物(wù))，采用(yòng)陽離子交換柱(zhù)進(jìn)行淨化(huà)可(kě)达(dá)到(dào)去(qù)除雜质，提(tí)高(gāo)檢測靈敏度(dù)、重(zhòng)現(xiàn)性(xìng)和(hé)回(huí)收(shōu)率的(de)效果(guǒ)。

固相萃取(qǔ)儀的(de)應(yìng)用(yòng)

固相萃取(qǔ)儀具有(yǒu)高(gāo)效、簡便的(de)特(tè)點(diǎn)。它(tā)可(kě)通(tòng)过(guò)該装置中(zhōng)的(de)气(qì)流調节(jié)閥来(lái)控制小柱(zhù)流速的(de)大(dà)小，並(bìng)可(kě)直接吹干(gàn)小柱(zhù)，保證每小柱(zhù)在(zài)活化(huà)洗脫过(guò)程中(zhōng)具有(yǒu)良好(hǎo)的(de)重(zhòng)現(xiàn) 性(xìng)。並(bìng)且可(kě)配套(tào)不(bù)同(tóng)規格的(de)固相萃取(qǔ)小柱(zhù)(如(rú)1mL，3mL，6mL等)使用(yòng)，一(yī)次(cì)操作(zuò)可(kě)同(tóng)时(shí)處(chù)理(lǐ)48个(gè)樣(yàng)品。我们(men)在(zài)奶粉中(zhōng)添加(2.0～50.0)   ug/mL等不(bù)同(tóng)濃度(dù)的(de)三(sān)聚氰胺，進(jìn)行加标(biāo)回(huí)收(shōu)和(hé)重(zhòng)現(xiàn)性(xìng)实验(yàn)，回(huí)收(shōu)率在(zài)95～99%之間(jiān)。相对(duì)标(biāo)準偏差均小于(yú)3%。

結論

固相萃取(qǔ)儀的(de)加压操作(zuò)是(shì)通(tòng)过(guò)在(zài)固相萃取(qǔ)小柱(zhù)的(de)上(shàng)方(fāng)施加一(yī)定压力空(kōng)气(qì)或(huò)N2来(lái)实現(xiàn)。

这樣(yàng)可(kě)加快(kuài)过(guò)濾速度(dù)，控制柱(zhù)子活化(huà)、淋洗、洗脫全(quán)过(guò)程的(de)流速，使溶液易于(yú)進(jìn)入(rù)固定相孔隙，有(yǒu)利于(yú)樣(yàng)液與(yǔ)固定相緊密接触，從而(ér)提(tí)高(gāo)萃取(qǔ)效果(guǒ)。它(tā)克(kè)服(fú)常規 的(de)手(shǒu)動(dòng)固相萃取(qǔ)操作(zuò)費时(shí)、不(bù)能(néng)确保穩定的(de)流速、不(bù)同(tóng)人(rén)員操作(zuò)結果(guǒ)偏差較大(dà)的(de)問(wèn)題(tí)，通(tòng)过(guò)簡單的(de)控制消除人(rén)为(wèi)操作(zuò)的(de)誤差，保證在(zài)短(duǎn)时(shí)間(jiān)內(nèi)同(tóng)时(shí)處(chù)理(lǐ)幾(jǐ)十(shí)个(gè)樣(yàng)品並(bìng)具有(yǒu)良好(hǎo)的(de)重(zhòng)現(xiàn)性(xìng)。